类器官技术是前沿的体外3D模型构建技术,能够利用干细胞或器官祖细胞,在特定因子诱导下自组织形成在结构、功能上高度模拟真实器官的微组织。我司提供专业的类器官构建与全方位鉴定服务,为您提供强大的疾病建模、药物筛选及发育生物学研究工具。
一、技术原理
类器官构建的核心原理是通过提供与体内发育相似的微环境信号,激活细胞固有的自组装与分化潜能。
其理论基础主要基于:
1. 细胞自组织能力: 干细胞或成体祖细胞在适宜的条件下,能够自发地增殖、迁移、分化和建立细胞间连接,遵循内在的发育程序,形成具有极性和特定空间结构的组织。
2. 微环境信号调控: 通过在培养基中添加特定的小分子化合物、生长因子和细胞因子,精确调控关键的发育信号通路(如Wnt, BMP, FGF, Notch等),模拟体内组织的生态位,指导细胞向目标细胞谱系分化。
3. 细胞外基质支持: 使用基质胶(Matrigel) 等模拟体内细胞外基质的材料,为细胞提供三维支撑结构、力学信号和生物化学信号,是类器官形成不可或缺的物理基础。
二、实验流程
我们的服务流程严谨而规范,确保每个环节的可控性与可重复性。整个流程主要分为培养构建与鉴定分析两大阶段。
三、 交付标准
类器官株:
1)每例类器官交付P3代次以上,冻存类器官2管,类器官数量大于500个,冻存或者活类器官交付;
2)类器官明场图像(提供40X、100X或200X明场图片);
3)客户接收到类器官,按照操作protocoL可以扩增传代。
肿瘤类器官构建服务:
1)每例组织样本经培养后最终交付P3代次类器官2管和鉴定报告(肿瘤类器官能够传代3代,免疫组化与原组织相似判定为类器官构建成功);
2)原组织石蜡切片白片5张或固定组织,癌组织和HE染色图片;
3)类器官明场图像(提供40X、100X或200X明场图片);
4)类器官石蜡白片5张或固定类器官样本与类器官HE染色图片;
5)实验报告(包括实验目的、实验方法、实验结果和数据分析等);
6)培养周期1个月,类器官能够稳定传代3代及以上,冻存两支,完成实验后,冷链运输至客户;
7)其他实验要求.
重要提示:以上为通用信息,具体项目所需样本量、流程、交付标准可能因物种、组织类型和实验设计而异,请在项目启动前与我司技术支持详细确认。
四、 类器官到货处理(示例)
1、 收到冻存类器官:放入-80冰箱12小时后,转移至液氮中,12h后可进行类器官复苏
复苏步骤如下
实验材料:传代缓冲液G、 肺癌类器官培养基A、基质胶(提前24 h放入4 ℃冰箱融化)、24孔细胞培养板、冰盒、15mL离心管、水浴锅、移液枪。
从液氮中取出冻存的类器官,快速置于37 ℃水浴锅中融解,水浴融解过程中,需轻轻摇动冻存管,以确保冻存液在短时间内完全融解;
(1)在类器官融解过程中,向15 mL离心管中提前加入10 mL传代缓冲液备用;
(2)使用1mL移液枪轻轻吸取冻存液,缓慢加入到准备好的缓冲液中,使用移液枪轻柔吹打2-3次,300 g离心5 min弃上清;
(3)再次向沉淀中加入约10 mL传代缓冲液,使用移液枪轻柔吹打2-3次(沉淀吹散即可),300 g离心5 min弃上清;
(4)使用200μL移液枪小心吸取残留上清,添加200 μL基质胶(通常的:复苏一管冻存类器官使用200 μL基质胶,复苏2管冻存的类器官使用400 μL基质胶)重悬(避免气泡产生),24孔细胞培养板按照25 μL-30 μL每孔点胶,基质胶全程维持在0-4 ℃条件下操作;
(5)细胞培养板放置37 ℃二氧化碳培养箱中10-15 min,待基质胶凝固后,每孔添加750 μL类器官培养基(常温)进行培养。
收到活体类器官:300g离心5分钟,去除上清液保留类器官细胞沉淀。
添加300μL基质胶,200μL移液器混匀,每孔添加30μL基质胶混合物至24孔细胞培养板中间,操作完毕将细胞培养板转移至37度二氧化碳培养箱,15min后,沿细胞板壁添加750μL培养基,操作完毕将细胞培养板转移至37度二氧化碳培养箱培养观察。
重要提示:以上为通用信息,具体项目所需样本量、流程、交付标准可能因物种、组织类型和实验设计而异,请在项目启动前与我司技术支持详细确认。
人源类器官
类器官株名称 | 规格 | 货号 |
肠癌类器官 | >10^6/管 | ZCKY-CRC-Organoids |
胃癌类器官 | >10^6/管 | ZCKY-GC-Organoids |
肺癌类器官 | >10^6/管 | ZCKY-LC-Organoids |
乳腺癌类器官 | >10^6/管 | ZCKY-BC-Organoids |
肝实质细胞癌类器官 | >10^6/管 | ZCKY-HCC-Organoids |
肝胆管癌类器官 | >10^6/管 | ZCKY-ICC-Organoids |
胆囊癌类器官 | >10^6/管 | ZCKY-GBC-Organoids |
神经内分泌瘤 | >10^6/管 | ZCKY-NET-Organoids |
疤痕类器官 | >10^6/管 | ZCKY-SCAR-Organoids |
子宫内膜癌类器官 | >10^6/管 | ZCKY-EC-Organoids |
卵巢癌类器官 | >10^6/管 | ZCKY-AOC -Organoids |
胰腺癌类器官 | >10^6/管 | ZCKY-PADC-Organoids |
食管癌类器官 | >10^6/管 | ZCKY-ESO-Organoids |
前列腺癌类器官 | >10^6/管 | ZCKY-PCA-Organoids |
膀胱癌类器官 | >10^6/管 | ZCKY-BCA-Organoids |
喉癌类器官 | >10^6/管 | ZCKY-COL-Organoids |
人正常肝类器官 | >10^6/管 | ZCKY-NH -Organoids |
人正常肠类器官 | >10^6/管 | ZCKY-NC -Organoids |
人正常肺类器官 | >10^6/管 | ZCKY-NL -Organoids |
人正常胃类器官 | >10^6/管 | ZCKY-NSTO -Organoids |
人正常胰腺类器官 | >10^6/管 | ZCKY-NPA -Organoids |
鼠源类器官
类器官株名称 | 规格 | 货号 |
鼠正常肝类器官 | >10^6/管 | ZCKY-MNH -Organoids |
鼠正常肺类器官 | >10^6/管 | ZCKY-MNL -Organoids |
鼠正常胰腺类器官 | >10^6/管 | ZCKY-MNPA -Organoids |
鼠正常胃类器官 | >10^6/管 | ZCKY-MSTO -Organoids |
鼠子宫内膜类器官 | >10^6/管 | ZCKY-MEN-Organoids |
鼠卵巢类器官 | >10^6/管 | ZCKY-MOV-Organoids |
小鼠小肠类器官 | >10^6/管 | ZCKY-MNSI-Organoids |
小鼠结肠类器官 | >10^6/管 | ZCKY-MNC-Organoids |
畸形胎鼠结肠类器官 | >10^6/管 | ZCKY-FMNC -Organoids |
大鼠小肠类器官 | >10^6/管 | ZCKY-RMSI -Organoids |
大鼠结肠类器官 | >10^6/管 | ZCKY-RMNC -Organoids |
其他动物来源类器官
类器官株名称 | 规格 | 货号 |
猪肝类器官 | >10^6/管 | ZCKY-PNH-Organoids |
猪肺类器官 | >10^6/管 | ZCKY-PNL-Organoids |
牛肺类器官 | >10^6/管 | ZCKY-OL-Organoids |
牛肝类器官 | >10^6/管 | ZCKY-ONL-Organoids |
猪肠类器官 | >10^6/管 | ZCKY-PNC-Organoids |
羊乳腺类器官 | >10^6/管 | ZCKY-SNB-Organoids |